進(jìn)口超濾管,又稱(chēng)離心超濾管,是一種基于膜分離技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室常用工具,通過(guò)離心力驅(qū)動(dòng)實(shí)現(xiàn)液體中不同分子量物質(zhì)的快速分離。其核心原理是利用超濾膜的孔徑選擇性截留特性,在壓力差作用下,小分子物質(zhì)(如溶劑、鹽、雜質(zhì))透過(guò)膜孔,而大分子目標(biāo)物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、核酸、病毒)被截留,從而實(shí)現(xiàn)濃縮、純化或緩沖液置換等操作。
超濾管通常由蓋子、過(guò)濾裝置(核心為超濾膜)及離心管三部分組成。膜材質(zhì)多樣,包括聚酯、聚丙烯、聚砜、聚醚砜等,不同材質(zhì)具有不同特性:聚酯膜生物相容性好,適用于生物藥品;聚丙烯膜性?xún)r(jià)比高,常用于水處理;聚砜和聚醚砜膜耐溫性強(qiáng),適用于高溫環(huán)境。膜孔徑范圍廣泛,截留分子量(MWCO)常見(jiàn)為1kDa、3kDa、10kDa、30kDa、50kDa及100kDa等,可根據(jù)目標(biāo)分子量靈活選擇。
1、離心條件控制
轉(zhuǎn)速與時(shí)間:
初始濃縮階段:較高轉(zhuǎn)速(如4000×g,10-30分鐘)快速去除小分子;
最終濃縮階段:降低轉(zhuǎn)速(如2000×g,5-10分鐘)減少剪切力對(duì)目標(biāo)分子的損傷。
溫度:低溫(4℃)離心可減少蛋白變性,但需平衡離心效率(低溫可能降低流速)。
避免過(guò)載:樣品體積不超過(guò)超濾管容積的80%,防止離心時(shí)溢出。
2、防止膜污染與堵塞
分步濃縮:若樣品體積大,可分多次離心,每次濃縮后補(bǔ)充緩沖液稀釋再濃縮。
反向沖洗:濃縮后用少量緩沖液反向沖洗膜表面,回收殘留目標(biāo)分子(尤其適用于高價(jià)值樣品)。
避免干燥:離心過(guò)程中膜表面不可完q干燥,否則可能損壞膜結(jié)構(gòu)或?qū)е履繕?biāo)分子不可逆吸附。
3、操作順序
濃縮:先離心去除小分子,再根據(jù)需要調(diào)整濃度。
換液:若需更換緩沖液,可分步加入新緩沖液并離心,逐步置換原有溶液(如透析替代法)。
清洗:使用后立即用去離子水沖洗膜表面,去除殘留樣品,防止交叉污染。
